Tủ ấm phòng thí nghiệm, tủ sấy tiệt trùng dụng cụ, tủ ấm vi sinh

Tủ âm sâu -80 độ, tủ bảo quản mẫu sinh học, tủ bảo quản sinh phẩm

Làm thế nào các cột có thể được làm sạch hoặc tái tạo?

Thứ hai - 05/04/2021 23:10

Các hiện tượng tăng áp suất ngược, thay đổi thời gian lưu / giảm hiệu suất của cột… là tất cả các triệu chứng phổ biến của cặn lắng trên đầu vào cột, trong cột hoặc trên bề mặt của pha tĩnh. Hầu hết các vấn đề này có thể được khắc phục bằng cách sử dụng quy trình rửa được áp dụng đúng cách. Càng sử dụng thủ tục tái tạo cột càng sớm thì càng có nhiều cơ hội khôi phục hiệu suất ban đầu cho cột

Các loài hấp phụ mạnh được thu thập ở đầu vào dung môi của cột và trong nhiều trường hợp, việc sử dụng dòng chảy ngược trong quá trình rửa là một cách. Trái ngược với quan niệm phổ biến, việc đảo ngược dòng chảy sẽ không bao giờ gây hại cho một cột được đóng gói tốt. Hướng dòng chảy được đề cập thường là hướng mà cột được đóng gói ban đầu. Xin lưu ý rằng các silicas ban đầu không đều / vô định hình tuy nhiên đại diện cho một vấn đề có thể xảy ra khi đảo ngược dòng chảy khi có thể tái cấu trúc lớp đệm được đóng gói. Cần hết sức cẩn thận khi đảo ngược dòng chảy trên các silicas không đều này.

Vui lòng kiểm tra các quy trình tái tạo được đề xuất của chúng tôi cho các họ pha khác nhau (RP, NP, Trao đổi ion, v.v.) và thực hiện kiểm tra CoA cột sau các quy trình này, nếu áp suất ban đầu được khôi phục, sẽ thực hiện đánh giá hiệu suất cột / đối xứng đỉnh.

Nếu được chăm sóc đầy đủ, có thể duy trì hiệu suất và độ tin cậy của cột trong một thời gian dài. Phần này nhằm cung cấp thông tin về các quy trình khác nhau để giúp kéo dài tuổi thọ của cột HPLC.

Sự khác biệt giữa làm sạch và tái tạo

Chúng tôi thường đưa ra giả định rằng, sau khi tách, tất cả vật liệu ban đầu có trong cột hoặc tiền bảo vệ đã được rửa giải. Sau khi chạy, cột được rửa đơn giản với 2-3 thể tích cột của hỗn hợp dung môi ban đầu trước khi bắt đầu cho phân tách mới. Tuy nhiên, một số tạp chất bị giữ lại nhiều trên cột sẽ tích tụ ở đầu vào, nếu thành phần pha động không đủ mạnh để rửa giải chúng trong quá trình chạy thường xuyên. Một số vấn đề không đáng kể có thể phát sinh khi điều này xảy ra: mất hiệu suất, tích tụ áp suất ngược, cắt đuôi đỉnh, dịch chuyển thời gian lưu hoặc trôi đường nền

Để tránh điều này, chúng tôi khuyên bạn nên thực hiện vệ sinh cột thường xuyên trước khi bất kỳ triệu chứng nào trong số này xảy ra. Quá trình này đơn giản và không yêu cầu sửa đổi thiết lập sắc ký thông thường. Khi việc làm sạch không đủ, có thể cần phải xử lý kỹ lưỡng hơn, tức là tái sinh, để tránh loại bỏ cột.

Các quy trình làm sạch và tái tạo được đề xuất
Càng sử dụng một quy trình làm sạch, thì các điều kiện cần thiết càng ít khắt khe hơn. Việc vệ sinh phải được thực hiện sau khi chạy một mẫu "bẩn" đã biết. Quy trình tái tạo phải được thực hiện trước khi lưu trữ cột, hoặc khi một cột có vẻ như bị tắc. Tốc độ dòng thường được đặt thấp hơn trong quá trình tách (thường từ 20% đến 50%).

Thể tích cột (bao gồm thể tích đóng gói) tính bằng mL = π x [Bán kính cột tính bằng cm] 2 x [Chiều dài cột tính bằng cm]

Quy trình làm sạch và tái tạo được đề xuất
Cột	Quy trình làm sạch được đề xuất	Quy trình tái tạo được đề xuất
SiliaChrom HPLC Column	- Đặt tốc độ dòng (20 đến 50% so với tốc độ thông thường) - Tráng với 2-3 thể tích cột của mỗi dung môi sau	- Ngược dòng cột - Đặt tốc độ dòng (20 đến 50% so với tốc độ thông thường) - Rửa bằng 10 thể tích cột của mỗi dung môi sau
Reversed-Phase Columns (C18, C8, C4, C1, Amine, Cyano, Phenyl, PFP, etc.)	- Water/ACN (95/5) to remove buffer - Water/ACN (5/95) - Mobile phase used during the separation	- Water/ACN (95/5) - THF - Water/ACN (5/95) - Mobile phase used during the separation
Normal Phase Columns (Amine, Cyano, Diol, etc.) Note: Never use water.	- MeOH/CHCl₃ (50/50) - Ethyl Acetate - Mobile phase used during the separation	- MeOH/CHCl₃ (50/50) - Isopropanol and ethyl acetate - Mobile phase used during the separation
Unbonded Silica Columns (Silica)	- Hexane, isopropanol and dichloromethane - Mobile phase used during the separation	- Hexane, isopropanol and dichloromethane - Mobile phase used during the separation
Ion Exchange Columns (SCX, SAX, etc.)	- 5 mM Phosphate Buffer pH 7.00 - Acetic Acid/Water (10/90) - Water, methanol and water	- 5 mM Phosphate Buffer pH 7.00 - Acetic Acid/Water (10/90) - Water, methanol and water