Hướng dẫn Sử dụng Cột HPLC

Thứ hai - 05/04/2021 22:45
Hướng dẫn sử dụng cột HPLC: cài đặt và vận hành; biện pháp phòng ngừa an toàn; mẫu & pha động và chăm sóc cột
Cột sắc ký lỏng HPLC
Cột sắc ký lỏng HPLC

Thông tin chung

Cột HPLC cao cấp chỉ có thể được sản xuất với vật liệu đóng gói tuyệt vời và kỹ thuật đóng gói tuyệt vời. Cột SiliaChrom® nổi tiếng với hiệu quả cao và sự phân tách có độ phân giải cao bằng cách sử dụng silica cực kỳ tinh khiết. Dựa trên silica hình cầu, hoàn toàn xốp, cột SiliaChrom® cung cấp độ ổn định hóa học và cơ học nâng cao cũng như độ phủ bề mặt rất cao và lớp phủ đầu cuối đầy đủ theo yêu cầu. Tất cả các cột SiliaChrom® đều được đóng gói bằng quy trình đóng gói bùn độc quyền để đạt được khả năng tái tạo đồng nhất và từ cột này sang cột khác. Các cột SiliaChrom® có độ chọn lọc tốt, tính không đối xứng tốt và tuổi thọ lâu dài để tách HPLC của các hợp chất hữu cơ có tính axit, trung tính và cơ bản, phân cực hoặc không phân cực.

Cài đặt và vận hành

Khi một cột được vận chuyển hoặc không được sử dụng, nó luôn được giới hạn ở cả hai đầu. Chỉ loại bỏ các mũ cuối khi cột được cài đặt trên một hệ thống. Người dùng phải luôn tuân theo hướng dòng chảy như được dán nhãn trên cột khi họ kết nối chúng với bất kỳ hệ thống HPLC nào ngoại trừ các mục đích đặc biệt, chẳng hạn như tháo phích cắm đầu vào. Kết nối cột phải được thực hiện đúng theo hướng dẫn.

Nếu các ống sắt được siết chặt quá mức, không được đặt đúng cách hoặc không phù hợp với phụ kiện, thì có thể xảy ra rò rỉ. Vui lòng đọc hướng dẫn kết nối cột như sau:

Đặt một đai ốc chống dò và một ferrule, theo thứ tự, lên một đoạn ống OD 1/16 ". Hãy chắc chắn rằng phần cuối rộng hơn của ferrule áp vào đai ốc.
Nhấn chặt ống vào khớp nối cuối cột. Trượt đai ốc và xoay về phía trước, vặn các ren và siết chặt đai ốc bằng ngón tay.
Trong khi tiếp tục ấn mạnh ống vào khớp nối cuối cột, sử dụng cờ lê 1/4 "để siết đai ốc 90 độ so với độ chặt của ngón tay.
Lặp lại quy trình này cho đầu bên kia của cột.

Biện pháp phòng ngừa an toàn

Cột SiliaChrom® thường hoạt động dưới áp suất cao. Bất kỳ kết nối lỏng lẻo nào cũng sẽ gây ra rò rỉ dung môi hữu cơ và các mẫu được bơm vào, điều này cần được coi là mối nguy hiểm. Trong trường hợp bị rò rỉ, cần đeo găng tay thích hợp để xử lý các chỗ rò rỉ. Người dùng không nên mở cột. Khi mở cột, phải sử dụng các biện pháp bảo vệ thích hợp để tránh hít phải các hạt silica nhỏ.

Mẫu và pha động

Để tránh làm tắc cột, tất cả các mẫu và pha động phải được lọc qua màng lọc 0,45µm hoặc 0,20µm trước khi sử dụng. Khuyến cáo rằng pha động chứa ít nhất 5% dung môi hữu cơ như metanol, axetonitril. Pha động phải luôn được khử khí trước khi sử dụng. Một cách đơn giản để khử khí là làm nóng dung dịch trong 5 phút dưới chân không nhẹ
Chăm sóc cột

Độ pH

Tránh sử dụng SiliaChrom® XT C18 Fidelity dưới pH 1,0 hoặc trên 12,0 *. PH cao hơn sẽ hòa tan silica, làm giảm hiệu quả phân tách và thay đổi thời gian lưu. Hiệu suất và hoạt động tối ưu cho thời gian tồn tại lâu nhất là ở pH 2,0 - 8,5.

Áp suất

Mặc dù cột SiliaChrom® có thể chịu được áp suất lên đến 400 bar, hoạt động bình thường phải dưới 250 bar. Sử dụng liên tục ở áp suất quá cao cuối cùng có thể làm hỏng cột và máy bơm. Dự kiến áp suất ngược của cột có thể tăng nhẹ sau một thời gian sử dụng nhất định. Áp suất ngược tăng đột ngột cho thấy có thể đã cắm ống dẫn vào của cột. Trong trường hợp này, nên xả cột bằng dòng chảy ngược trong dung môi thích hợp (trong nhiều trường hợp có hàm lượng nước cao).
Nhiệt độ
Nhiệt độ hoạt động tối đa là 60 ° C. Sử dụng cột liên tục ở nhiệt độ cao (> 45 ° C) có thể làm giảm tuổi thọ của cột, đặc biệt trong điều kiện pH cao (> 8).

Bảo quản

Khi không sử dụng trong thời gian dài, không được để pha động có hàm lượng nước cao hoặc nhiều muối trong cột. Loại bỏ dung dịch đệm còn lại trong cột bằng cách rửa nó với 20 - 30 cột dung dịch metanol hoặc axetonitril 50%, tiếp theo là 20 - 30 cột dung môi hữu cơ như metanol hoặc axetonitril. Mỗi cột được vận chuyển với hai nắp cuối có thể tháo rời để tránh làm khô giường cột. Nắp cả hai đầu khi cột không được sử dụng.

Tổng số điểm của bài viết là: 5 trong 1 đánh giá

Xếp hạng: 5 - 1 phiếu bầu
Click để đánh giá bài viết

  Ý kiến bạn đọc

Bạn đã không sử dụng Site, Bấm vào đây để duy trì trạng thái đăng nhập. Thời gian chờ: 60 giây